LAD 2细胞中文说明书
产品名称:LAD2细胞、LAD 2细胞、LAD-2细胞
中文名称:人肥大细胞肉瘤/白血病细胞
种属:人
来源:肥大细胞肉瘤/白血病细胞
年龄: 44岁(44 years)
性别: 男(Male)
细胞类型: 肥大细胞(Mast cell)
生长特性: 悬浮生长(Suspension)
细胞形态:
代数:P1代
复苏周期:2周
仅供科研使用,不得用于临床诊断。
拆包/储存:
1. 请立即检查包装袋是否有破损或漏液
2. 请立即将细胞培养瓶从包装盒中取出,并按照下方操作步骤进
行培养传代
注意:如为冻存管,请收到后立即解冻培养。若来不及解冻,请储存于液氮中(存储于负80度,会降低细胞存活率)
培养瓶中细胞操作步骤:
对于悬浮培养的细胞,寄送前,我们会将培养基充满整个培
养瓶,以减少产品运输过程中细胞所受震荡。
1. 收到细胞产品后,请注意观察是否有污染。将培养瓶置于倒置
显微镜下仔细检查是否浑浊、是否细菌污染。
2. 将培养瓶竖直放置于37℃培养箱中直至温度平衡,随后,在生
物安全柜中,转移培养瓶中的细胞至离心管中,离心200×g / 5 - 10 min,去除上清后,用5mL培养基吹散细胞。
3. 对上述细胞悬液进行细胞计数及活力检测,调整细胞密度至 2- 3×105cells/mL,并转移至新的培养瓶中。
4. 将培养瓶竖直放置于含有5% CO 的37℃恒温培养箱中培养。如
果细胞达到传代培养的密度,则进行传代培养。
冻存细胞操作步骤:
注意:为保存细胞的高存活率,请收到产品后,立即解冻培养。
1.将冻存管置于37℃ 水浴中来回晃动,迅速解冻。为避免污染,确保冻存管口置于水面之上。解冻需迅速,大约2分钟。
2. 一旦冻存管中液体融化后,立即取出,采用 70%酒精喷拭冻存 管表面。从此步开始,后续操作须在生物安全柜中完成。
3.将冻存管中的液体转移到含有5mL完全培养基的离心管中, 离心200×g / 5 - 10 min,用真空泵去除含有冻存液的上清。
4.用完全培养基重新悬浮细胞并转移到新的培养瓶中。为保证细胞复苏的存活率,请将培养基在37℃水浴预热后使用。
5. 将细胞置于含有5%CO2 的37℃恒温培养箱中培养。
悬浮细胞传代培养:
悬浮细胞的传代可通过补加或置换新鲜培养基的方式来完成,具体做法如下:
1. 取出少量细胞悬液进行细胞计数及活力检测,当细胞密度达到1.5×106 cells/mL 时,进行细胞传代培养。
2. 取足量细胞加入到盛有新鲜培养基的培养瓶中,将细胞密度维持在5×105cells/mL。
3. 将培养瓶竖直放置于含有5%CO2 的37℃恒温培养箱中培养 。如果细胞达到传代培养的密度 ,则进行传代培养。
培养基换液: 每隔 2 至 3 天。
注意:
培养瓶应使用带滤膜瓶盖,以保持培养基中的空气和CO2
细胞冻存:
离心收集细胞后,加入适量冻存液(每管细胞冻存量达到10的6次方),将冻存管放入冻存盒置于负80冰箱,24h后将冻存管转入液氮长期保存。
推荐HAKATA无血清细胞冻存液H-W-50/H-W-100
