| 特点 | DMEM培养基;10%胎牛血清;1%双抗;复苏5-7天,冻存次日发货 |
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| 特性 | 贴壁生长,上皮细胞样;MDA-MB-231来自患有转移乳腺腺癌的51岁女病人的胸水。在裸鼠和ALS处理的BALB/c小鼠中,它能形成低分化腺癌(III级)。 | 优势 | STR原始数据图谱,支原体、真菌、细菌检测报告 T25瓶80%密度提供发货照片;≥1*106冻存管2支;二选一 1、提供代数靠前细胞 2、公司常年有不同买馈赠、促销等活动形式 3、价格优势 4、售后服务到位,专业技术一对一操作指导 |
| 特点 | DMEM培养基;10%胎牛血清;1%双抗;复苏5-7天,冻存次日发货 |
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| 特性 | 贴壁生长,上皮细胞样;MDA-MB-231来自患有转移乳腺腺癌的51岁女病人的胸水。在裸鼠和ALS处理的BALB/c小鼠中,它能形成低分化腺癌(III级)。 | 优势 | STR原始数据图谱,支原体、真菌、细菌检测报告 T25瓶80%密度提供发货照片;≥1*106冻存管2支;二选一 1、提供代数靠前细胞 2、公司常年有不同买馈赠、促销等活动形式 3、价格优势 4、售后服务到位,专业技术一对一操作指导 |
贴壁细胞接收注意事项:贴壁细胞经过快递运输颠簸会出现漂浮脱落等情况: 收到先放培养箱静置稳定。如有脱落需收集处理,处理细节请查阅以下信息,原瓶内为运输培养液,血清含量只有5%,需及时更换专用完全培养基。
贴壁细胞传代步骤:
准备工作:胰酶和完全培养基(需要提前37度复温)、PBS(常温)避免细胞遇冷受刺激
(1) 吸出原培养液
(2) 加入2ml左右PBS,轻轻晃动培养瓶润洗细胞,吸出PBS丢弃
(3) 加入1ml左右0.25%含EDTA的胰酶,轻轻晃动培养瓶使之浸润所有细胞。
(4) 根据不同的细胞放入培养箱时及时关注消化时间,消化约2-3min,显微镜下看到细胞中间的细胞明显分离变圆细胞间隙变大,显微镜下看细胞呈单个游离状态,侧立培养瓶细胞可以滑落时可终止消化,可以轻拍培养瓶侧身。(消化时主要看消化状态,如果没有变圆,侧立时不能滑落时,可以适当延长消化时间,每30s观察一次细胞)
(5) 加入3ml含10%血清的培养基终止消化,轻轻吹打细胞使之脱壁并在液体里反复轻轻吹打(不要太用力)使细胞尽量呈单颗细胞的悬浮液。
(6) 收集细胞悬液离心,1000rpm/min(约250g) 5分钟,离心完吸出上清丢弃。
(7) 加入新鲜完全培养基,吹打几下混匀细胞即可,按需接种到新培养瓶,补足完全培养基,拧松瓶盖或使用透气瓶盖进行培养。
(8) 检查培养箱二氧化碳,温度和水盘。
特别注意的是第4步消化过程,消化至到细胞完全变圆以后侧立培养瓶细胞可以出现滑落时再终止消化。
后续处理建议:传代后2-3天换液一次即可,(如细胞第二天全部贴壁培养基颜色变黄,可以换液,)无需每天换液(换液太勤可能会损失细胞影响细胞状态)换液时候如果没有特殊情况也可以不用PBS清洗
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