MUTZ-3细胞,人急性骨髓性白血病细胞培养说明
细胞背景：1993 年诊断时一名 29 岁急性骨髓单核细胞白血病男性的外周血（AML FAB M4）;该细胞系对 TSLP 有反应性，并作为树突状细胞模型。

https://www.dsmz.de/collection/catalogue/details/culture/ACC-295

细胞来源：德国DSMZ

出售：P2代

细胞鉴定：STR 鉴定已通过

细胞特性：形态：圆形爆破状细胞以单细胞形式生长，有时以小团状悬浮生长。

用途：仅供科研使用。

培养条件：1） 准备 60% α-MEM（含核糖核苷和脱氧核糖核苷）+20%FBS（推荐HAKATA新西兰胎牛血清NZ-FBS-500）+5637细胞培养过的培养基上清 20%+还可以添加 GM-CSF(100 U/ml)、IL-3 (100 U/ml) 和 M-CSF (100 U/ml) 或 SCF (50 ng/ml) 更好

2） 培养条件： 空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为 70%-80%。

悬浮细胞操作步骤：

大多数悬浮细胞对于环境比较敏感，建议一直维持高密度生长，一般情况下细胞密度维持在 1×10 5 到 1×10 6个/mL（不同细胞对密度要求不同）。如需分瓶可以将细胞悬液收集到离心管中 800-1000rpm，离心 5min，弃去上清，补加 1-2mL 培养液后重悬混匀后将细胞悬液按 1：2 的比例（首次可以 1:1 分瓶）分到新 T25 瓶中，添加 5-6ml 按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按 1:2 和以上比例进行。大多数血液类相关的悬浮细胞受运输影响比较大，会出现一批死细胞，如果因此密度降低了，可以离心后转移至T25 瓶中竖着培养，培养基添加 5ml 以提高总体密度，隔一天后观察密度可以的话再补液 3ml 完全培养基后 T25瓶放倒，等沉淀稳定后观察细胞密度，持续添加培养基等密度上升足够传代为止。

运输方式：

常温发货：收到后 T25 瓶消毒再放置培养箱静置 2-3 小时后观察密度和状态拍照 2-3 张反馈给销售，密度达标就可以传代。前期传代比例 1:2，等再次长满后传代时建议冻存其中一整瓶成 1 个 1ml 冻存管，另外一瓶继续传代，反复冻存 2-3 只后才扩增做实验，以防突发情况引起断种。

干冰发货：常规细胞发货冻存管 2 只，复苏 1 只，另外一只备用，第一个复苏不成功时严格按照厂家要求复苏第二个，均没有复苏成功的情况即时留存复苏照片通知销售。

生物安全：

1. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

2. 建议在复苏冻存细胞时始终使用防护手套、衣服和戴上防护面罩。注意：冻存管浸没在液氮中会泄漏，并会慢慢充满液氮。解冻时，液氮转化成气相可能导致容器爆炸或用危险力吹掉其盖子，从而产生飞扬的碎屑造成人员伤害。